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藥物體外抗菌試驗中瓊脂擴散法有哪些方法
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  • 2024-06-27
  • 來源：中科檢測

    藥物體外抗菌試驗包括抑菌實驗和殺菌實驗。抑菌：即抑制微生物的生長繁殖，但不能殺死微生物，在藥物除去后微生物又能生長；殺菌：即能殺死微生物，當藥物除去后，微生物也不能再生長繁殖。兩者并非絕對，只是在一定條件下相對而言。


    瓊脂擴散法是常用的藥物體外抗菌試驗方法，那么瓊脂擴散法中有哪些方法類型？下面跟著中科檢測小編來了解。



    藥物體外抗菌試驗瓊脂擴散法介紹


    瓊脂擴散法原理：


    藥物可以在瓊脂培養基中自由擴散，形成一定濃度的含藥區域。由于各種微生物對不同藥物或同一藥物不同濃度的敏感性不同，因而形成一定大小的抑菌圈或抑菌距離，根據其大小，可以了解藥物的抗菌作用大小或是微生物對試驗藥物的敏感性。


    瓊脂擴散法具有方法簡便，技術要求不高，易掌握操作的特點。但精確度不高，一般能用于定性或初步判斷其作用的強弱。


    藥物體外抗菌試驗中瓊脂擴散法包括挖溝法和濾紙片法，具體方法步驟如下：


    1、挖溝法：


    在瓊脂平板上挖溝，溝兩邊垂直劃線接種各種試驗菌，溝內加入藥液。


    培養后，根據溝兩邊所生長的試驗菌離溝的距離來判斷藥物對試驗菌的抗菌作用強弱。


    適用于在一個平板上試驗一種藥物對幾種不同試驗菌的抗菌作用。


    2、濾紙片法：


    制成含菌平板后，將濾紙片蘸取藥液置于平板上，培養后觀察結果，量取抑菌圈直徑以此判斷試驗藥物抑菌作用的強弱。


    用于新藥的初篩及臨床的藥敏試驗。


    藥物體外抗菌試驗影響因素


    1、試驗菌：


    用專門的供應機構提供的標準菌株。


    試驗菌應合理保藏，用前加以純化及生物學特征鑒定。


    所用的試驗菌株應處于對數生長期，因此期的微生物對外界因素變化最敏感。


    試驗結果的靈敏度在一定程度上與試驗菌的接種量成反比關系，故應選用適宜的接種量。


    2、培養基


    抗菌試驗的培養基應按試驗菌的需求配制，如鏈球菌常用含血清的肉湯培養基，抗真菌藥物試驗需用沙氏培養基。


    培養基的酸堿度、電解質、還原性物質等均可影響試驗結果，實驗時應盡可能排除各種影響實驗結果因素的摻入。


    經無菌檢查合格。


    3、抗菌藥物


    藥物的濃度、pH及含有的其他成分均可影響試驗結果，特別是中草藥制劑往往含有色素、雜質和鞣質等，這些均可造成錯誤結果，應加注意。


    4、對照試驗：


    為精確判斷實驗結果，試驗時應設各種對照，包括試驗菌對照、已知藥物對照及溶劑和稀釋液對照等。