熒光定量檢測

熒光定量檢測

熒光定量是指在 PCR 擴增反應體系中加入熒光基團,通過對擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時檢測,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。中科檢測開展熒光定量檢測。
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檢測介紹
熒光定量 PCR(Real-time PCR),是指在 PCR 擴增反應體系中加入熒光基團,通過對擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時檢測,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。中科檢測開展熒光定量檢測服務。
檢測方法
以探針法熒光定量 PCR 為例:PCR 擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。
開始時,探針完整地結合在 DNA 任意一條單鏈上,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收,檢測不到熒光信號;PCR 擴增時,Taq 酶將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條 DNA 鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與 PCR 產物形成完全同步。
檢測標準
GB/T 19495.5-2018 轉基因產品檢測 實時熒光定量聚合酶鏈式反應(PCR)檢測方法
GB/T 36226-2018 不銹鋼 錳、鎳、鉻、鉬、銅和鈦含量的測定 手持式能量色散X射線熒光光譜法(半定量法)